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第一篇 苏云金芽孢杆菌HBF-13

第一章 杀金龟子幼虫的苏云金芽孢杆菌资源的筛选3

一、苏云金芽孢杆菌资源筛选现状3

二、杀金龟子幼虫的苏云金芽孢杆菌资源的分离4

（一）土样采集4

（二）分离培养基4

（三）土样分离4

（四）分离结果4

三、苏云金芽孢杆菌对金龟子幼虫效果的生物测定9

（一）生测方法9

（二）生测结果10

四、苏云金芽孢杆菌资源的展望15

第二章 HBF-1菌株芽孢与编码伴胞晶体基因的特殊性17

一、芽孢17

（一）芽孢的结构与功能17

（二）芽孢的萌发与形成18

（三）影响HBF-1菌株芽孢萌发的因子20

（四）HBF-1菌株芽孢的特殊性24

二、伴胞晶体28

（一）伴胞晶体的形态特征28

（二）伴胞晶体蛋白基因及其多样性29

（三）HBF-1菌株编码伴胞晶体基因的特殊性30

第三章 苏云金芽孢杆菌HBF-1菌株的生物学特性35

一、试验材料与方法35

（一）试验材料35

（二）试验方法36

二、试验结果与分析37

（一）HBF-1菌株培养特征及细胞学性状37

（二）HBF-1菌株在LB液体培养基中的生长曲线37

（三）HBF-1菌株生理生化反应与血清型鉴定38

（四）HBF-1菌株对抗生素的敏感性38

（五）HBF-1菌株对氨基酸的需求及缬氨酸生物合成代谢受阻机制39

（六）HBF-1菌株晶体蛋白的SDS-PAGE分析40

（七）HBF-1菌株产生β-外毒素的测定42

第四章 苏云金芽孢杆菌HBF-1菌株的杀虫机制43

一、毒素的杀虫机制与昆虫中肠上皮细胞的毒素受体的关系43

（一）中肠上皮细胞的毒素受体43

（二）毒素的杀虫机制44

二、昆虫中肠蛋白酶对杀虫晶体活性的影响45

（一）昆虫中肠液的酸碱度和蛋白酶组成45

（二）中肠液酸碱度对杀虫晶体蛋白毒力的影响46

（三）肠道蛋白酶对杀虫晶体蛋白的活化作用46

（四）肠道蛋白酶对杀虫晶体蛋白杀虫专一性的影响47

（五）昆虫中肠液对杀虫晶体蛋白的过度降解与沉淀作用48

三、关于HBF-1杀虫机制及今后研究方向49

第五章 苏云金芽孢杆菌HBF-1菌株发酵工艺及发酵培养基优选50

一、发酵工艺流程和条件50

（一）发酵工艺流程50

（二）发酵工艺条件50

二、发酵培养基优选与中试生产52

（一）发酵培养基优选52

（二）中试生产55

第六章 苏云金芽孢杆菌HBF-1菌株的安全性57

一、动物的安全性57

（一）动物的安全性试验方法57

（二）动物安全性试验结果58

二、农业生态的安全性59

（一）试验方法59

（二）研究结果60

第七章 苏云金芽孢杆菌HBF-1防治金龟幼虫的田间应用技术64

一、HBF-1悬浮剂防治花生田金龟子幼虫的田间试验64

（一）田间小区试验64

（二）田间防治示范66

（三）HBF-1制剂防治花生田金龟子幼虫应用技术67

二、防治马铃薯金龟子幼虫田间试验67

（一）田间小区试验67

（二）田间防治示范68

（三）HBF-1制剂防治马铃薯田金龟子幼虫技术69

三、防治草坪金龟子幼虫田间小区试验69

四、苏云金芽孢杆菌HBF-1菌株杀虫剂在应用中的作用和防治效果评价70

（一）苏云金芽孢杆菌HBF-1菌株杀虫剂在应用中的作用70

（二）防治效果评价72

五、成本核算72

第八章 转Bt基因植物的现状与HBF-1菌株在转基因植物中的展望73

一、转Bt基因植物的现状73

（一）转基因植物发展现状73

（二）转基因抗虫植物研究74

（三）转Bt毒蛋白基因植物及其抗虫效应74

（四）转Bt毒蛋白基因植物的商品应用75

（五）应用的转Bt基因植物76

二、HBF-1菌株在转基因植物中的展望78

第九章 酶联免疫在苏云金芽孢杆菌治理金龟上的应用81

一、材料和方法81

（一）细胞培养和晶体制备81

（二）蛋白含量的测定82

（三）抗血清的制备82

（四）酶联免疫法（ELISA）82

（五）吐温20和Triton X-100对免疫反应的影响82

（六）土壤中原毒素的提取83

二、研究结果84

（一）SDS-PAGE84

（二）用3种ELISA方法比较抗体和Buibui菌株原毒素间的反应84

（三）Buibui菌株原毒素和抗体反应的专一性84

（四）免疫反应中原毒素含量的影响84

（五）几种Bt原毒素的交叉反应85

（六）吐温20和Triton X-100对免疫反应的影响85

（七）直接碱溶法提取土壤中的原毒素85

（八）涡旋法或Polytron提取土壤中的晶体蛋白86

三、研究中存在的问题87

第十章 金龟子的人工饲养及HBF-1菌株的生物测定方法89

一、材料与方法89

（一）主要金龟子成虫的采集89

（二）成虫的饲养与产卵89

（三）卵的孵化及卵的保存89

（四）金龟子幼虫的饲养90

二、金龟子的人工饲养90

（一）金龟子成虫的采集90

（二）成虫的饲养与产卵90

（三）卵的孵化与保存91

（四）金龟子幼虫的饲养92

（五）蛹期的饲养管理93

三、对金龟幼虫高毒力HBF-1菌株生物测定方法93

（一）对金龟幼虫高毒力菌株的筛选93

（二）对金龟幼虫高毒力菌株的毒力测定94

参考文献94

第二篇 有害金龟治理105

第一章 中国土壤昆虫研究概况105

一、中国土壤昆虫研究历史回顾105

二、中国大陆土壤昆虫的种类106

三、我国重要土壤害虫发生态势107

（一）重要土壤害虫种类107

（二）重要土壤害虫发生情况107

四、土壤金龟甲研究进展108

（一）多样性与系统学108

（二）农作物金龟110

（三）林果金龟111

（四）草原金龟112

（五）烟草金龟113

（六）草坪金龟113

（七）防治手段与技术113

（八）营养学与资源开发利用113

（九）亚显微形态114

第二章 土壤金龟的生物学与防治方法115

一、生物学特点115

（一）发生世代115

（二）活动规律115

（三）越冬虫态115

（四）取食类型115

（五）为害虫态115

二、土壤有害金龟的防治115

（一）防治研究的阶段及其特点115

（二）有害金龟的防治方法116

第三章 中国重要土壤金龟种类识别与发生118

一、形态特征118

（一）成虫118

（二）幼虫119

二、重要种类识别与发生124

成虫分科检索表124

幼虫分科检索表124

鳃金龟科125

成虫种检索表126

幼虫检索表129

丽金龟科156

成虫分种检索表157

幼虫检索表158

犀金龟科173

成虫种检索表173

常见幼虫检索表174

花金龟科180

成虫种检索表181

常见幼虫检索表182

斑金龟科188

参考文献189