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第一章 绪论1

一、酶工程的基本概念1

二、酶工程的研究对象2

三、酶工程与相关学科的关系5

复习思考题6

第二章 酶催化的基础知识7

第一节 酶催化的特点7

一、催化效率高7

二、催化专一性强7

三、反应条件温和7

四、酶对环境极敏感8

五、酶在机体中受到严格的调控8

第二节 酶的分类命名8

一、酶的国际分类命名系统8

二、工业酶制剂的命名和分类9

三、一些习惯归类10

四、核酸酶的分类命名11

第三节 酶分子的结构特征11

一、酶蛋白的结构特征11

二、酶的辅因子12

三、酶活性部位13

第四节 酶活力测定14

一、酶活力单位和比活力14

二、酶活力测定的一般条件15

三、酶活力测定方法概要15

第五节 酶促反应速度及其影响因素16

一、酶促反应速度方程16

二、温度对酶促反应的影响19

三、pH对酶反应的影响20

四、抑制剂和激活剂对酶反应的影响21

第六节 酶抑制剂对酶的作用22

一、酶抑制作用的类型和抑制程度表示法22

二、抑制剂的作用方式22

三、可逆抑制作用反应速度方程的特点23

复习思考题26

第三章 酶制剂的发酵（培养）生产28

第一节 概述28

一、酶制剂生产概况28

二、微生物酶生物合成的诱导和阻遏28

三、酶的分泌31

第二节 微生物酶制剂发酵生产的一般工艺31

一、发酵法生产酶制剂的一般工艺流程31

二、酶生产菌种31

三、生产菌种子的制备34

四、培养基的配制35

五、其他发酵条件及其控制37

六、发酵过程的中间补料39

第三节 发酵过程细胞生长与酶合成之间的关系40

一、微生物生长速度方程41

二、微生物酶生物合成与生长的关联模式42

三、酶合成速度方程43

第四节 动、植物酶的生产43

一、从现成动、植物材料中制取酶的一般过程44

二、动、植物细胞组织培养材料制取酶的技术概要44

复习思考题47

第四章 酶的分离纯化及产品成型48

第一节 酶的提取分离49

一、发酵液的预处理49

二、细胞破碎和细胞碎片的过滤分离50

三、酶的提取及注意事项51

四、液—液双水相萃取法分离酶53

第二节 酶分离纯化的沉淀、离心和膜过滤技术54

一、酶的沉淀分离法55

二、膜分离法59

三、离心技术61

第三节 几种常规液相色谱法在酶分离纯化中的应用64

一、常规液相柱色谱法的基本操作过程64

二、吸附色谱法66

三、离子交换色谱法66

四、凝胶柱色谱法68

五、亲和色谱法及其他色谱法70

第四节 电泳技术在酶的分离纯化中的应用72

一、电泳的基本原理73

二、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）73

三、等电聚焦电泳76

第五节 酶液的浓缩、结晶、干燥与酶制剂成型78

一、浓缩78

二、结晶78

三、固体酶制剂的成型、干燥与保存80

第六节 酶的纯度和酶制剂的质量82

一、酶纯化过程的纯度监测82

二、酶纯度的鉴定83

三、酶制剂的质量标准84

复习思考题86

第五章 工程酶（Ⅰ）——固定化酶87

第一节 概述87

一、工程酶的概念87

二、固定化酶的含义88

三、固定化酶的优缺点89

四、固定化酶研制的一般步骤89

第二节 固定化酶的制备89

一、吸附法90

二、包埋法91

三、共价键结合法92

四、热处理法95

第三节 固定化酶的性质96

一、固定化酶的基本评估指标96

二、固定化对酶反应性能的影响97

三、固定化酶动力学性质99

四、固定化酶的稳定性103

第四节 固定化细胞和原生质体104

一、细胞固定化104

二、原生质体固定化109

复习思考题112

第六章 工程酶（Ⅱ）113

第一节 修饰酶113

一、物理修饰酶113

二、化学修饰酶114

三、基因工程修饰酶120

第二节 生物工程酶121

一、基因克隆酶121

二、突变酶（基因修饰酶）121

三、抗体酶123

四、杂合酶125

第三节 合成酶和印迹酶126

一、合成酶126

二、印迹酶128

第四节 核酶与脱氧核酶129

一、核酶130

二、脱氧核酶132

三、核酶和脱氧核酶的应用134

复习思考题136

第七章 有机溶剂中的酶催化作用138

第一节 酶催化反应的有机介质体系138

一、含微量水的有机溶剂体系139

二、水—水溶性有机溶剂单相体系139

三、水—水不溶性有机溶剂两相体系139

四、（正）胶束体系和反胶束体系139

第二节 有机溶剂中酶催化作用的影响因素140

一、水140

二、有机溶剂141

三、酶的应用形态（式）142

四、其他因素144

第三节 有机溶剂中酶催化的反应及应用举例145

一、有机溶剂中酶催化反应的类型145

二、外消旋体的光学拆分147

三、糖和甾体的选择性酰化149

四、肽合成149

复习思考题151

第八章 酶定向进化152

第一节 酶基因的随机突变153

一、易错PCR技术154

二、DNA重排技术154

三、基因家族重排技术156

第二节 酶突变基因的定向选择157

一、突变基因文库的构建158

二、突变基因的筛选160

第三节 酶定向进化的应用163

一、提高酶的催化活力163

二、增强酶的稳定性164

三、提高底物专一性和增加对新底物的催化活力165

复习思考题166

第九章 酶反应器167

第一节 酶反应器的特点和设计基础知识167

一、酶反应器的特点167

二、酶反应器的分类168

三、酶反应器设计的主要内容168

四、酶反应器设计计算基础知识169

第二节 几种常用的酶反应器173

一、分批式反应器（BSTR）173

二、连续流搅拌罐反应器（CSTR）174

三、填充床反应器（PFR）174

四、流化床反应器（FBR）175

五、膜型酶反应器175

六、鼓泡塔式反应器176

七、喷射式反应器177

八、辅酶再生系统177

第三节 酶反应器的选型和操作177

一、酶反应器选型的一般原则177

二、工业上常用的三类酶反应器选择因素比较178

三、酶反应器的操作179

四、酶反应器操作最优化181

第四节 酶反应器的应用182

一、酶反应器的发展182

二、酶反应器的应用182

复习思考题184

第十章 几种工业酶制剂185

第一节 碳水化合物酶（一）185

一、α-淀粉酶185

二、葡萄糖淀粉酶（糖化酶）188

三、β-淀粉酶189

四、脱枝酶（支链淀粉酶）190

第二节 碳水化合物酶（二）191

一、纤维素酶191

二、果胶酶193

三、溶菌酶194

四、乳糖酶195

五、转化酶（蔗糖酶）196

第三节 蛋白酶196

一、蛋白酶的分类196

二、蛋白酶的性质197

三、微生物蛋白酶的工业生产197

四、木瓜蛋白酶198

五、蛋白酶的用途198

第四节 脂肪酶198

一、脂肪酶的基本性质198

二、脂肪酶的发酵生产199

三、脂肪酶的用途200

第五节 其他酶200

一、葡萄糖异构酶200

二、葡萄糖氧化酶201

三、环状糊精（生成）酶201

四、氨基酸酰化酶（酰化氨基酸水解酶）202

五、天冬氨酸酶202

复习思考题203

第十一章 酶的应用204

第一节 酶在医药方面的应用204

一、酶在疾病诊断方面的应用204

二、治疗用酶205

三、酶在药物制造方面的应用207

第二节 酶在食品和轻化工方面的应用209

一、酶在食品工业中的应用209

二、酶在轻化工业中的应用213

第三节 酶法分析215

一、单酶反应定量216

二、偶联酶反应定量216

三、酶标免疫法217

四、酶电极及其应用217

第四节 酶在生物工程方面的应用218

一、酶法破除细胞壁218

二、基因工程离不开工具酶219

第五节 酶在环境保护及新能源开发方面的应用220

一、酶在环境保护方面的应用220

二、酶在新能源开发中的应用222

复习思考题224

主要参考文献225