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单元一　生物技术实验要求与基本技能1

一、实验室规则1

二、实验记录及实验报告2

三、实验误差与数据处理3

四、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制5

五、常用仪器的使用方法6

单元二　分光光度技术14

一、光的基本知识14

二、吸光度与透光率15

三、朗伯－比尔（Lambert-Beer）定律16

四、分光光度计结构简介17

五、分光光度技术的应用18

六、分光光度法的误差20

单元三　电泳技术21

一、电泳的基本原理21

二、影响迁移率的主要因素22

三、电泳的分类24

四、几种常见的电泳法25

五、电泳后的染色30

六、电泳结果处理32

单元四　层析技术34

一、吸附层析35

二、分配层析36

三、离子交换层析37

四、凝胶层析40

五、亲和层析45

六、高效液相色谱47

单元五　离心技术51

一、基本原理51

二、离心机的性能及用途53

三、离心方法55

单元六　生物大分子制备技术58

一、材料的选择和预处理59

二、细胞的破碎及细胞器的分离61

三、生物大分子的提取和分离纯化63

四、样品的浓缩、干燥、保存及纯度鉴定66

单元七　膜分离技术70

一、基本原理70

二、膜的性质70

三、透析71

四、超滤71

五、电渗析72

六、纳米过滤72

单元八　酶联免疫技术（ELISA）73

一、基本原理73

二、操作要点75

单元九　生物化学实验项目80

氨基酸及蛋白质类实验80

实验一　薄层层析法分离鉴定氨基酸80

实验二　纸层析法分离鉴定氨基酸81

实验三　氨基氮的测定——甲醛滴定法83

实验四　蛋白质的沉淀反应85

实验五　蛋白质的两性反应和等电点测定87

实验六　双缩脲法测定蛋白质含量89

实验七　Folin－酚试剂法测定蛋白质含量91

实验八　考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量92

实验九　紫外吸收法测定蛋白质含量93

实验十　微量凯氏定氮法测定粗蛋白含量95

实验十一　乙酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质99

实验十二　蛋白质的脱盐技术102

实验十三　酪蛋白的制备105

实验十四　SDS－聚丙烯酰胺凝胶（CPAGE）电泳测定蛋白质相对分子质量106

实验十五　血清免疫球蛋白的分离纯化及鉴定109

核酸类实验114

实验十六　动物组织DNA的提取与含量测定114

实验十七　酵母RNA的提取及定性定量鉴定116

实验十八　质粒DNA的提取119

实验十九　PCR基因扩增技术122

实验二十　DNA琼脂糖凝胶电泳124

酶学实验125

实验二十一　温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响125

实验二十二　琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制127

实验二十三　血清乳酸脱氢酶同工酶的分离与测定129

实验二十四　大蒜超氧化物歧化酶（SOD）的分离提取与活性测定131

实验二十五　蛋白酶活力测定134

实验二十六　大麦萌发前后淀粉酶活力的比较136

实验二十七　酶联免疫吸附法（ELISA）测定克伦特罗138

实验二十八　酶联免疫吸附法（ELISA）测定食品中磺胺二甲嘧啶残留142

实验二十九　蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法145

维生素及激素类实验147

实验三十　维生素B2的定量测定（荧光法）147

实验三十一　维生素C的定量测定（2,6－二氯酚靛酚滴定法）148

实验三十二　脂溶性维生素的测定（高效液相色谱法）151

实验三十三　畜禽肉中己烯雌酚残留的测定（高效液相色谱法）154

糖类及叶绿素实验156

实验三十四　总糖和还原糖测定（3,5－二硝基水杨酸比色法）156

实验三十五　费林试剂热滴定法测定还原糖158

实验三十六　血糖的定量测定（福林－吴宪法）161

实验三十七　果胶的提取163

实验三十八　叶绿素含量的测定（分光光度法）165

脂类实验167

实验三十九　粗脂肪的定量测定（索氏抽提法）167

实验四十　卵磷脂的提取及鉴定168

实验四十一　脂肪碘值的测定169

实验四十二　脂肪酸价的测定172

附录173

一、常用溶液浓度的单位及计算173

二、标准溶液的配制与标定174

三、常用缓冲溶液的配制176

四、一般化学试剂的分级182

五、易变质和需要特殊方法保存的试剂182

六、常用市售酸、碱的浓度183

七、硫酸铵饱和度常用表183

八、指示剂184

九、元素的相对原子质量表187

十、常见蛋白质主要参数188

十一、常用凝胶数据表190

十二、实验室分析用水规格及标准193

十三、离心机转速与相对离心力的换算图193

主要参考书目195