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第一节 流式细胞术发展史1

第一章 流式细胞仪的结构和原理1

第二节 流式细胞仪的结构和工作原理2

一、流式细胞仪的结构3

二、流式细胞仪的主要技术指标9

三、流式细胞仪补偿设置11

第一节 样本单细胞悬液的制备方法16

一、新鲜实体组织样本的制备16

第二章 流式细胞术样品制备及分析技术16

二、组织活检、内镜取材标本单细胞悬液的制备19

三、石蜡包埋组织样本的制备19

四、外周血单个核细胞样本的制备20

五、骨髓细胞单细胞悬液的制备20

六、培养细胞单细胞悬液的制备21

七、脱落细胞单细胞悬液的制备21

第二节 样品的荧光标记、检测和分析22

一、荧光标记原理22

三、溶血剂的应用27

二、细胞破膜剂的应用27

第三节 免疫细胞的样品制备和分析28

一、基本原理28

二、淋巴细胞亚群分析29

第四节 DNA含量检测样品的染色和分析33

一、分析DNA含量样品的制备33

二、细胞DNA含量的分析33

第五节 细胞凋亡的检测和分析36

二、早期细胞凋亡的流式细胞术检测——AnnexinVFITC/PI法39

一、早早期细胞凋亡的流式细胞术检测——半胱氨酸蛋白酶3检测法39

三、早期细胞凋亡的流式细胞术检测——Apo2.7检测法40

四、晚期细胞凋亡的流式细胞术检测——TUNEL法40

五、晚晚期细胞凋亡的流式细胞术检测——DNA含量分析法41

六、细胞凋亡相关基因蛋白的流式细胞术检测42

第六节 血小板及其活化的FCM分析43

一、血小板表面标记的检测方法43

二、用流式细胞术计数网织血小板43

三、用流式细胞术检测血小板相关抗体44

四、用流式细胞术检测活化的血小板46

五、用流式细胞术检测血小板的注意事项47

第七节 造血干细胞（CD*34＋细胞）的检测48

一、CD*34检测方案的标准化49

二、DNA/RNA染料／CD*34-PE/CD*45-PC5定量荧光微球检测52

三、CD*34＋计数的质量控制54

第八节 白血病细胞免疫分型55

一、标本的收集、保存和处理56

二、单克隆抗体的选择56

三、免疫表型的分析程序57

四、仪器分析与结果判断58

五、流式细胞术在白血病免疫分型中的临床应用59

六、流式细胞术用于白血病免疫分型中的注意事项61

七、白血病微小残留病的检测62

第九节 定量流式细胞术62

一、细胞表面分子的定量分析62

二、微球流式芯片技术66

一、细胞RNA含量样品的制备及分析69

第十节 流式细胞术在其他相关指标检测中的应用69

二、细胞蛋白质总量样品的制备及分析70

三、网织红细胞样品的制备及分析70

四、外周血CD4＋细胞CD*45-RA/CD*45R0的表达72

五、外周血CD4＋细胞CD*40/CD*40L的表达73

六、Th1细胞和Th2细胞的检测73

七、外周血白细胞HLA-B*27的表达76

八、阵发性睡眠血红蛋白尿患者外周血细胞的流式细胞术分析78

九、多药耐药基因蛋白表达的检测79

一、流式细胞仪的可变性81

第十一节 流式细胞术参数的质量控制81

二、标本的可变性86

三、操作过程的可变性89

四、数据分析的可变性90

第三章 人体流式细胞术参数的正常参考值92

第四章 流式细胞术彩色图谱实例及其分析96

第一节 不同方法对肿瘤细胞DNA含量的分析97

一、1例肺癌患者瘤组织细胞DNA含量的不同分析方法97

二、DNA直方图和假三维图98

一、低渗处理99

第二节 实验条件对流式细胞术分析结果的影响99

二、未固定细胞样品染色后存放时间对细胞表面标志检测结果的影响100

三、在散射光图上设一个“门”分析多种参数100

四、用CellQuest软件设多个“门”分析某1种参数101

五、在DNA含量分析时去除二联体细胞的方法103

六、校准流式细胞仪线性度和检测流式细胞仪灵敏度104

七、在细胞DNA直方图上鉴别细胞凋亡与DNA异倍体G0/1期细胞峰105

八、在DNA直方图上鉴别细胞增殖（SPF）与DNA异倍体G0/1细胞峰106

九、细胞凋亡和细胞坏死在细胞DNA直方图上的比较分析107

十、磁珠分离与骨髓组织各种细胞的百分率109

第三节 细胞总蛋白质含量分析111

第四节 细胞RNA含量检测111

第五节 细胞DNA倍体分类112

一、DNA含量分析参数112

二、二倍体细胞113

三、近二倍体细胞116

四、四倍体细胞119

五、非整倍体细胞121

六、多异倍体128

第六节 DNA倍体异质性分析133

一、肿瘤原发灶DNA倍体异质性分析——同质体肿瘤135

二、肿瘤原发灶DNA倍体异质性分析——异质体肿瘤139

三、肿瘤原发灶DNA倍体异质性分析的临床意义149

四、肿瘤原发灶和淋巴结转移灶细胞DNA倍体异质性分析154

五、肿瘤原发灶和癌旁组织细胞DNA倍体异质性分析157

第七节 人类体细胞染色体的流式细胞术分析160

第八节 细胞动力学参数检测161

一、细胞增殖活性的检测163

二、用增殖细胞核抗原（PCNA）检测细胞增殖活性165

三、用Ki-67检测细胞增殖活性166

四、用CD71检测细胞增殖活性168

五、用BrdU单克隆抗体检测细胞增殖活性170

六、细胞周期素的检测171

七、细胞凋亡的检测173

八、细胞分化的检测190

第九节 机体免疫功能的检测192

一、外周血T细胞、B细胞、NK细胞的同步检测法195

二、外周血T细胞的检测196

三、外周血B细胞的检测206

四、外周自然杀伤（NK）细胞的检测209

第十节 造血干细胞的表达211

一、荧光标记单参数检测造血干细胞——CD34-FITC212

二、荧光标记双参数检测造血干细胞214

三、荧光标记三参数检测造血干细胞——ProCOUNT法218

第十一节 白血病细胞的免疫分型220

一、正常骨髓CD45/SSC流式细胞术图谱220

二、急性淋巴细胞白血病（ALL）的免疫表型特征220

三、急性粒细胞白血病的免疫表型特征230

四、混合型白血病的免疫表型特征246

五、骨髓异常增生综合征（MDS）的免疫表型分析248

六、多发性骨髓瘤（MM）的免疫表型分析249

七、慢性淋巴细胞增殖性疾病250

第十二节 细胞生长因子的检测251

一、白介素2受体（IL-2R,CD25）251

二、干扰素γ（IFN-γ）252

三、α肿瘤坏死因子（TNF-α）252

五、可溶性血清蛋白分子（CBA）的检测253

四、细胞内细胞生长因子的检测253

第十三节 网织红细胞的检测256

第十四节 血小板的检测258

一、血小板表面糖蛋白（CD41）的检测259

二、血小板抗体的检测260

三、网织血小板的识别和统计分析261

四、活化血小板的检测265

第十五节 HLA-B27表达的检测268

第十六节 常见癌基因编码蛋白的检测272

一、抑癌基因编码蛋白表达的检测273

二、癌基因编码蛋白表达的检测280

三、调整基因编码蛋白的检测286

四、多药耐药基因编码蛋白（P*170）的表达291

五、Fas基因蛋白的检测296

第十七节 流式细胞术在生殖医学中的应用297

第十八节 细胞中自发荧光药物浓度的检测300

第十九节 流式细胞术在移植中的应用301

第二十节 流式细胞术在阵发性夜间血红蛋白尿（PNH）诊断中的应用305

第二十一节 ALL病人KOR—SA*3544表达与Ph染色体频率307