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第一部分 常用生物化学实验技术及原理1

第一章 生化实验基本操作1

一、玻璃仪器的洗涤与清洁1

二、吸量管的种类和使用3

三、溶液的混匀6

四、过滤6

五、离心机的使用方法6

六、生物化学常用缓冲液7

第二章 实验样品的制备9

一、植物样品的制备9

二、动物样品的制备11

三、微生物样品的制备13

第三章 分光光度法15

一、基本原理15

二、分光光度法常用符号及意义17

三、物质定性分析&l8

四、物质定量分析18

五、分光光度计21

第四章 电泳技术23

一、基本原理23

二、纸电泳24

三、醋酸纤维薄膜电泳25

四、琼脂凝胶电泳26

五、聚丙烯酰胺凝胶电泳26

第五章 层析法35

一、柱层析法的一般实验技术35

二、吸附层析38

三、分配层析41

四、离子交换层析45

五、凝胶层析50

六、亲和层析55

七、薄层层析58

第二部分 基础实验62

实验一 总糖的测定—蒽酮比色法62

实验二 糖的硅胶G薄层层析65

实验三 总氮量的测定—凯氏（Micro—KJeldahl）定氮法67

实验四 蛋白质的两性反应和等电点的测定72

实验五 蛋白质的沉淀及变性实验75

实验六 蛋白质的呈色反应77

实验七 纸层析法分离鉴定氨基酸81

实验八 考马斯亮兰G—250染色法测定蛋白质含量83

实验九 Lowry酚试剂法测定蛋白质含量85

实验十 酪蛋白的制备87

实验十一 紫外光谱吸收法测定蛋白质含量89

实验十二 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳93

实验十三 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳95

实验十四 酶的特异性98

实验十五 影响酶活性的因素100

实验十六 淀粉酶活性的测定102

实验十七 枯草杆菌蛋白酶活力测定105

实验十八 紫外分光光度法测定核酸的含量108

实验十九 琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA110

第三部分 生物化学大实验112

实验二十 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离禽类血清蛋白112

实验二十一 SDS—聚丙烯酰胺凝胶测定蛋白质相对分子质量115

实验二十二 离子交换柱层析法分离氨基酸118

实验二十三 卵清蛋白的分段盐析、透析和凝胶过滤脱盐121

实验二十四 凝胶过滤法测定蛋白质相对分子质量125

实验二十五 改良Mohum法测定血清谷—丙转氨酶活性验127

实验二十六 粗脂肪的提取和定量测定131

实验二十七 维生素C的定量测定133

实验二十八 大蒜细胞SOD的提取与分离135

实验二十九 动物肝脏RNA的制备（苯酚法）138

实验三十 小牛胸腺DNA的制备（浓盐法）140

参考实验一 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳—血清蛋白的分离142

参考实验二 亲和层析纯化胰蛋白酶146

参考实验三 PAGE法分离过氧化物同工酶150

参考资料153

附录154

一、硫酸铵饱和度计算表154

二、缓冲溶液的配制156

三、常见蛋白质相对分子质量参考值172

四、常见蛋白质等电点参考值174

实验室规则177