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第一章 糖类鉴定和定量测定1

第一节 糖类的鉴定和分析方法3

实验一 糖的呈色反应和定性鉴定3

实验二 糖类的薄层层析鉴定7

实验三 Smith降解法测定糖链的序列13

第二节 糖类定量测定方法16

实验四 总糖和还原糖的测定（一）16

实验五 总糖和还原糖的测定（二）21

实验六 还原糖的测定（三）24

实验七 还原糖的测定（四）27

实验八 碘量法测定葡萄糖的含量31

实验九 蒽酮比色法测定可溶性糖含量33

实验十 邻甲苯胺法测定血糖的含量36

实验十一 糖原的测定38

第二章 脂类41

第一节 脂肪提取和测定41

实验一 粗脂肪的提取和测定43

实验二 卵磷脂的提取及鉴定47

第二节 脂类的鉴定方法49

实验三 薄层层析法分析膜磷脂49

实验四 脂类染色法54

第三节 油脂的化学性质59

实验五 油脂酸价的测定60

实验六 脂肪碘值的测定62

实验七 油脂皂化值的测定67

实验八 油脂羟值的测定70

实验九 油脂过氧化值的测定73

实验十 油脂总羰基价的测定75

第四节 血清中脂类的测定77

实验十二 血清胆固醇的测定78

实验十三 血清中甘油三酯的测定81

实验十四 血清中磷脂的测定83

实验十五 酶法测定血清中游离脂肪酸86

第三章 蛋白质89

第一节 蛋白质含量的测定91

实验一 紫外吸收法测定蛋白质含量91

实验二 Folin酚法（Lowry法）测定蛋白质的含量95

实验三 考马斯亮蓝法（Bradford法）测定蛋白质含量99

实验四 BCA法测定蛋白质含量102

第二节 蛋白质的纯度和亚单位的检测104

实验五 连续的非变性凝胶电泳法104

实验六 不连续SDS-PAGE垂直电泳及考马斯亮蓝染色法107

实验七 SDS-PAGE蛋白凝胶的酸性银染法115

实验八 蛋白免疫印迹法116

实验九 等电聚焦测定蛋白质等电点119

第三节 蛋白质的分类纯化124

实验十 蛋白质盐析分离124

实验十一 分子筛法对蛋白质脱盐127

实验十二 DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白130

实验十三 亲和层析——镍柱纯化分离天然状态的带有His标签的蛋白质134

实验十四 TCA法和丙酮法沉淀浓缩蛋白质139

第四章 酶学实验142

第一节 常见酶活力的测定142

实验一 水解酶活性的测定143

实验二 氧化还原酶活性的测定146

实验三 转移酶活性的测定149

实验四 异构酶活性的测定152

实验五 裂解酶活性的测定155

第二节 酶的动力学研究157

实验六 酵母蔗糖酶的粗酶制备过程157

实验七 蔗糖酶活力的测定和比活力的分析159

实验八 蔗糖酶的盐析和凝胶层析脱盐165

实验九 DEAE纤维素柱层析纯化蔗糖酶170

实验十 底物浓度对催化反应速度的影响及米氏常数Km173

实验十一 用正交法测定几种因素对蔗糖酶活力的影响177

第五章 代谢产物的鉴定和测量184

第一节 代谢产物的定性鉴定185

实验一 糖酵解中间产物的鉴定185

实验二 肌糖原的酵解作用188

实验三 ATP的生物合成的测定192

实验四 纸层析法定性检测氨基移换反应195

实验五 生物氧化的电子传递实验198

实验六 脂肪转化为糖的定性实验201

实验七 激素对血糖浓度的调控作用202

第二节 代谢产物的定量测定204

实验八 脂肪酸的β-氧化——酮体测定法204

实验九 氨基转换作用的测定（分光光度法）209

实验十 二乙酰-肟法测定血清尿素氮212

第六章 核酸类实验215

第一节 核酸的提取和鉴定216

实验一 琼脂糖凝胶电泳检测DNA216

实验二 RNA的变性琼脂糖凝胶电泳219

实验三 质粒DNA的碱裂解法提取与纯化221

实验四 植物组织中DNA的提取224

实验五 酵母RNA的分离与鉴定228

实验六 动物肝脏DNA的提取与纯化230

第二节 核酸的定量测定233

实验七 紫外吸收法测定核酸的含量233

实验八 定磷法测定核酸的含量236

实验九 二苯胺法测定DNA的含量240

实验十 地衣酚（苔黑酚）法测定RNA的含量242

附录245

一 生物化学实验室规则245

二 实验误差246

三 实验室安全知识248

四 关于有毒化学药品的知识253

（一）高毒性固体253

（二）毒性危险气体254

（三）毒性危险液体和刺激性物质254

（四）其他有毒物质255

（五）致癌物质256

（六）具有长期积累效应的毒物256

（七）溴化乙锭溶液的净化处理257

（八）实验操作中对所用的特殊化学试剂应注意的安全事项257

五 生物化学实验室基本知识和操作261

（一）玻璃仪器的洗涤、清洁与干燥261

（二）清洗液的原理与配制262

（三）吸量管的种类和使用263

（四）容量瓶及量筒266

（五）滴定管267

（六）易变质及需要特殊方法保存的试剂268

（七）溶液的配制268

（八）溶液的混匀269

（九）过滤269

六 生物化学实验常用仪器的使用270

（一）722S型分光光度计的使用方法270

（二）UV/VIS-5100紫外-可见分光光度计的使用276

（三）酸度计的使用283

（四）离心机的使用287

（五）可调式微量移液器的使用291

七 生物化学实验常用数据及参数295

（一）硫酸铵饱和度的计算表295

（二）常用酸、碱的密度和浓度297

（三）氨基酸的主要参数298

（四）常用蛋白质相对分子质量标准参照物299

（五）核酸、蛋白质换算数据299

八 缓冲液的配制300

（一）常用缓冲溶液的配制300

（二）酸度计用的标准缓冲液的配制304

九 常用酸碱指示剂305

十 层析技术有关介质性质及数据307

（一）离子交换纤维素307

（二）常见离子交换树脂的有关性质308

（三）葡聚糖凝胶的有关技术数据310

（四）聚丙烯酰胺凝胶的有关技术数据311

（五）琼脂糖凝胶的有关技术数据311

（六）各种凝胶所允许的最大操作压312