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第一章 绪论1

一、饲用酶制剂研究与应用概况1

（一）饲用酶制剂种类1

（二）饲用酶制剂的作用机理3

（三）饲用酶制剂的实际应用效果5

二、饲用植酸酶基础与应用研究概况及该项研究的背景8

（一）植酸的生物学作用8

（二）植酸酶作用机理与应用研究概况16

三、固体发酵技术用于生产饲料用酶的意义25

（一）固体发酵的定义、历史25

（二）固体发酵的基本过程和主要特征26

（三）固体发酵与液体发酵的区别27

（四）固体发酵与液体发酵优缺点的比较29

（五）利用固体发酵生产饲用酶的优势31

附：本专著介绍的研究内容32

第二章 植酸酶活测定不同方法的比较研究及微板法的建立38

第一节 几种常用植酸酶活测定方法的比较研究38

一、引言38

二、材料和方法39

三、实验结果40

（一）各种方法的灵敏度40

（二）各种方法的稳定性40

（三）各种方法的线性范围42

（四）精确度的比较42

（五）测定误差的比较43

（六）测定方法抗干扰能力比较44

（七）4种方法最大吸收峰的测定46

四、结果讨论46

第二节 微板法的建立47

一、引言47

二、材料和方法48

三、结果48

（一）最大光吸收值48

（二）稳定性测定49

（三）灵敏度49

（四）精确度的测定50

（五）线性范围50

（六）误差分析50

（七）各种微板质量的评定51

四、结果讨论51

第三章 植酸酶产生菌的筛选、选育及液体发酵条件的研究53

第一节 植酸酶产生菌的筛选53

一、引言53

二、筛选方法54

（一）样品来源54

（二）样品初筛55

（三）菌种复筛55

（四）植酸酶酶活测定56

（五）无机磷含量测定56

（六）植酸钠中无机磷的去除56

三、实验结果56

（一）初筛实验结果56

（二）复筛实验结果56

（三）“假酶活”的扣除58

（四）菌株G2初步鉴定64

第二节 植酸酶产生菌的改良66

一、引言66

二、材料和方法67

三、实验结果69

（一）各种抗生素的MIC值测定69

（二）紫外线诱变69

（三）黑曲霉抗多粘菌素突变体的复筛结果70

（四）第二次复筛71

（五）NaF和磷酸霉素对植酸酶活抑制研究72

（六）胞外蛋白测定72

（七）无机磷对突变体产酶量的影响结果73

四、结果讨论73

第三节 菌株G2.16液体发酵条件的研究75

一、碳源对产酶的影响75

二、氮源对产酶的影响76

三、金属离子对产酶的影响78

四、无机磷对产酶的影响78

五、培养基的pH对产酶的影响79

六、发酵温度对酶活产生的影响80

七、通风量对产酶的影响80

八、表面活性剂对产酶的影响81

九、发酵时间与产酶之间的关系81

十、正交实验优化培养基82

十一、正交实验的验证83

第四章 植酸酶单克隆抗体的研制及在固体发酵高产菌株选育中的应用85

第一节 抗原的纯化87

一、引言87

二、材料和方法87

三、实验结果89

第二节 单克隆抗体的研制92

一、引言92

二、材料和方法93

三、结果100

（一）杂交瘤的筛选100

（二）腹水效价的测定100

（三）单抗的纯化100

（四）PhytA单抗特异性鉴定101

第三节 G2.1诱变处理及固体发酵高产菌株的筛选101

一、引言101

二、材料和方法102

三、实验结果103

（一）用phytA单抗酶联免疫反应进行突变菌株的复筛103

（二）紫外和NTG诱变结果105

（三）多粘菌素对菌株的抑制作用105

（四）无机磷对菌株产酶的抑制作用105

（五）菌株稳定性的测定106

四、结论106

第五章 植酸酶固体发酵条件的研究109

第一节 植酸酶三角瓶固体发酵条件的研究109

一、引言109

二、材料和方法109

三、实验结果110

（一）附加碳源对菌株产酶的影响110

（二）附加氮源对菌株产酶的影响112

（三）附加水分对产酶的影响113

（四）初始pH对酶活产生的影响114

（五）不同来源的种子及不同的接种量对菌株产酶的影响114

（六）无机磷对酶活产生的影响115

（七）表面活性剂对酶活产生的影响116

（八）原料种类对植酸酶产生的影响117

（九）不同培养温度对菌株产酶的影响117

（十）响应面分析优化培养基118

（十一）植酸酶菌株发酵动力学研究122

第二节 植酸酶浅盘扩大培养125

一、浅盘扩大培养培养基的优化125

二、翻曲对产酶的影响129

三、料层厚度对产酶的影响131

四、接种方式对产酶的影响132

五、较大规模的固体发酵生产植酸酶的实验134

六、浅盘固体发酵过程的动态分析134

七、消毒条件的研究138

第六章 植酸酶提取、纯化、酶学性质及酶应用特性的研究139

第一节 植酸酶粗酶的提取及酶应用特性的研究139

一、引言139

二、材料和方法140

三、实验结果140

（一）酶的提取140

（二）酶的沉淀144

（三）酶应用性质的研究145

第二节 黑曲霉G2.1.1.1.4产植酸酶的纯化及酶学性质的研究151

一、引言151

二、材料和方法153

（一）化学试剂153

（二）主要仪器设备154

（三）实验方法154

三、实验结果159

（一）植酸酶的提取和纯化159

（二）酶纯度鉴定163

（三）分子量大小的确定164

（四）含糖量的测定166

（五）氨基酸组成的测定166

（六）紫外吸收光谱167

（七）植酸酶等电点的测定168

（八）植酸酶的基本酶学性质169

（九）植酸酶作用动力学研究172

四、结果讨论175

第七章 G2.1.1.1.4固体发酵其他酶系的研究178

一、引言178

二、材料和方法179

三、实验结果180

（一）G2.1.1.1.4三角瓶固体发酵所得干曲酶系测定180

（二）G2.1.1.1.4浅盘扩大实验其他酶系的研究181

（三）液体酶产品酶活的测定182

四、结果讨论183

第八章 G2.1.1.1.4产植酸复合酶的应用研究184

第一节 植酸复合酶对以麦麸为主要原料的配合饲料体外模拟水解实验184

一、引言184

二、材料和方法184

（一）材料184

（二）实验方法185

三、实验结果186

（一）无机磷测定结果186

（二）植酸酶处理对Ca2＋、Mg2＋、 Zn2＋离子的释放效果186

（三）植酸酶对碳水化合物的释放效果188

（四）植酸酶对水溶性维生素的释放效果188

（五）植酸酶对蛋白质的释放作用190

（六）植酸酶对氨基酸的释放作用191

四、结果讨论192

第二节 植酸酶处理提高米糠营养价值的研究194

一、引言194

二、外加植酸酶对米糠中植酸的降解作用195

三、植酸酶的不同处理在制粒过程中稳定性的研究197

四、米糠代谢能的测定198

五、种公鸡对不同处理米糠中磷利用率的研究199

六、结论200

第三节 饲用复合酶对肉鸡生长性能影响的研究201

一、引言201

二、材料和方法202

三、实验结果与分析203

四、结论204

第四节 植酸酶在产蛋鸡饲料中应用的效果实验204

一、引言204

二、实验设计205

三、材料和方法206

四、实验结果与分析207

五、经济效益分析208

六、结论208

第九章 植酸酶作用机理的探讨209

一、引言209

二、材料和方法210

三、结果与讨论210

“植酸酶的研究”专著的结论与创新215