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基础篇1

第1章 流式细胞术及其原理3

1.1流式细胞术3

1.2流式细胞仪的基本结构4

液流系统5

光学系统7

电子系统10

分选系统28

1.3流式细胞仪的主要技术指标29

荧光分辨率29

荧光灵敏度29

前向角散射光灵敏度30

分析／分选速度30

分选纯度30

分选收获率30

参考文献30

第2章 流式细胞术的质量控制33

2.1环境要求33

2.2仪器的校正33

2.3样本的要求34

2.4合理设计对照34

2.5获取实验数据和分析35

参考文献35

操作篇37

第3章 流式细胞术单细胞悬液的制备39

3.1单层培养细胞分散为单个细胞39

3.2新鲜实体组织分散为单个细胞39

机械法39

酶处理法40

化学试剂处理法40

3.3石蜡包埋组织分散为单个细胞40

二甲苯脱蜡法40

组织清洁剂脱蜡法41

甲氧-双氧水处理法41

参考文献42

第4章 流式细胞术的应用43

4.1细胞周期和DNA倍体分析43

概述43

荧光探针46

DNA检测的常用术语48

样品制备49

上机检测（以PI标记的标本在BD FACSCalibur流式细胞仪检测为例）50

数据分析53

注意事项55

应用举例57

4.2 DNA的双参数分析60

试剂60

样品制备60

上机检测61

结果分析63

注意事项64

4.3凋亡检测65

凋亡的诱导67

细胞凋亡的形态学分析68

Annexin V凋亡检测法71

caspase-3分析80

碘化丙啶（PI）单染色法88

线粒体膜电位的检测92

细胞内活性氧的检测99

DNA片段检测107

4.4肿瘤细胞多药耐药检测118

细胞表面膜糖蛋白表达水平的检测119

罗丹明123蓄积实验123

4.5细胞免疫表型分析127

概述127

淋巴细胞免疫表型分析130

应用举例135

影响免疫表型分析的一些问题137

4.6细胞因子的测定139

细胞内细胞因子检测140

流式微球分析（cytometric beads array，CBA）法检测细胞外细胞因子153

参考文献170

常见问题解答篇171