图书介绍

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生物化学实验技术原理和方法
  • 李菡,郭兴启主编 著
  • 出版社: 北京:中国农业出版社
  • ISBN:9787109184039
  • 出版时间:2013
  • 标注页数:226页
  • 文件大小:37MB
  • 文件页数:241页
  • 主题词:生物化学-实验-高等学校-教材

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图书目录

上篇 生物化学实验技术原理1

第一章 生物化学实验样品制备技术1

第一节 植物样品的制备1

一、植株组织样品的采集、制备和保存1

二、籽粒样品的采集、制备和保存2

三、瓜果样品的采集、制备和保存3

四、丙酮干粉的制备3

第二节 动物样品的制备3

一、血液样品3

二、组织样品5

三、尿液样品5

第三节 微生物样品的制备6

一、微生物细胞的收集方法6

二、干细胞制剂的制备6

三、破碎细胞的方法6

第二章 电泳技术8

第一节 基本原理8

一、影响电泳的因素8

二、电泳的分类9

第二节 几种常用电泳技术介绍10

一、醋酸纤维素薄膜电泳10

二、琼脂糖凝胶电泳11

三、聚丙烯酰胺凝胶电泳12

四、聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳16

五、等电聚焦电泳17

六、双向电泳18

七、变性梯度凝胶电泳18

第三章 离心技术20

第一节 基本原理20

一、离心力20

二、沉降系数20

第二节 离心机的种类和基本结构21

一、种类21

二、基本结构21

三、分析型超速离心机22

第三节 制备超离心法22

一、差速离心法22

二、密度梯度离心法23

第四章 层析技术26

第一节 层析技术的原理和分类26

一、层析技术的原理26

二、层析技术的分类26

第二节 几种常用的层析法27

一、分配层析27

二、薄层层析28

三、凝胶层析28

四、亲和层析30

五、离子交换层析31

六、吸附层析32

七、高效液相色谱32

八、气相色谱33

第五章 光谱分析技术35

第一节 基本原理35

第二节 可见及紫外吸收光谱分析36

一、可见及紫外分光光度计37

二、常用的可见及紫外吸收光谱分析方法38

三、影响可见及紫外吸收光谱分析的因素39

第三节 荧光发射光谱分析40

一、荧光分光光度计40

二、常用的荧光分析方法41

三、影响荧光分析的因素41

四、荧光分析的应用43

第六章 核技术在生物科学中的应用44

第一节 放射性核素的特点44

一、同位素及其稳定性44

二、原子核衰变及放射性44

三、放射性衰变规律45

四、核素的测量47

第二节 同位素示踪技术在生化分析中的应用48

一、同位素示踪技术在代谢分析中的应用48

二、同位素示踪技术在分子杂交中的应用48

第三节 辐射安全防护及放射性实验室规则50

一、核辐射的个人剂量限制50

二、放射性污染51

三、放射性废物的处理51

四、放射性实验室规则52

第七章 免疫化学技术53

第一节 免疫化学技术理论基础53

一、抗原的相关概念53

二、抗体的结构和功能54

三、抗原抗体的结合56

四、动物的常规免疫57

第二节 常见免疫化学技术59

一、酶联免疫吸附试验60

二、免疫印迹61

三、原位杂交组织化学62

主要参考文献63

下篇 生物化学实验方法64

第八章 糖类化学64

实验1 可溶性糖的定量测定64

方法一 蒽酮法64

方法二 苯酚-硫酸法66

实验2 还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法68

实验3 血糖的定量测定70

方法一 葡萄糖氧化酶法70

方法二 邻甲苯胺法71

实验4 直链淀粉和支链淀粉含量的测定——碘比色法73

实验5 可溶性糖的硅胶G薄层层析75

第九章 脂类化学78

实验6 粗脂肪的提取和定量测定——索氏抽提法78

实验7 血清三酰甘油的含量测定80

实验8 血清总胆固醇含量的测定82

方法一 磷硫铁法82

方法二 邻苯二甲醛法84

实验9 酮体的生成与利用85

第十章 蛋白质化学88

实验10 纸层析法分离鉴定氨基酸88

实验11 谷物种子中赖氨酸含量的测定90

实验12 种子蛋白的氨基酸组分分析——氨基酸自动分析仪法91

实验13 谷物种子蛋白质组分的分离提取93

实验14 蛋白质的两性性质和酪蛋白等电点的测定94

实验15 血红蛋白的两性解离96

实验16 蛋白质含量测定97

方法一 凯氏定氮法97

方法二 双缩脲法100

方法三 Folin-酚法102

方法四 考马斯亮蓝G-250法104

方法五 紫外吸收法105

方法六 BCA法107

实验17 蛋白质相对分子质量测定108

方法一 凝胶过滤法108

方法二 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法112

实验18 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳116

实验19 小麦高分子质量麦谷蛋白亚基聚丙烯酰胺凝胶电泳118

实验20 蛋白质印迹——Western blotting120

第十一章 核酸化学124

实验21 核酸含量的测定124

方法一 定磷法测定核酸含量124

方法二 紫外吸收法测定核酸含量126

实验22 核酸的电泳分离鉴定128

方法一 DNA的琼脂糖凝胶电泳128

方法二 RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳130

方法三 尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳132

实验23 酵母RNA的分离及组分鉴定133

实验24 质粒DNA的提取与检测135

实验25 总DNA的提取138

方法一 植物总DNA的提取——CTAB法138

方法二 动物肝脏中总DNA的提取139

实验26 RNA的提取141

方法一 总RNA的小量提取——TRIzol法141

方法二 总RNA的大量提取——异硫氰酸胍法142

实验27 聚合酶链式反应(PCR)144

实验28 核酸的分子杂交145

方法一 Southern印迹杂交145

方法二 Northern印迹杂交148

第十二章 酶化学152

实验29 枯草杆菌蛋白酶活力测定152

实验30 淀粉酶活性的测定154

实验31 硝酸还原酶活性的测定156

实验32 NBT法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力159

实验33 胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定161

实验34 精氨酸激酶的分离纯化及活力测定165

实验35 影响唾液淀粉酶活力的因素168

实验36 底物浓度对酶促反应速度的影响——过氧化氢酶Km值的测定171

实验37 酶浓度对酶促反应速度的影响——碱性磷酸酶活性测定174

实验38 过氧化物同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳176

第十三章 维生素178

实验39 维生素A的定量测定178

实验40 还原型维生素C含量的测定——2,6-二氯酚靛酚法180

实验41 维生素C含量的测定——紫外比色法182

实验42 维生素B1的定性测定183

实验43 维生素B2的荧光测定185

第十四章 新陈代谢188

实验44 糖酵解中间产物的鉴定188

实验45 转氨基反应的定性鉴定190

实验46 谷丙转氨酶活性的测定192

实验47 脂肪酸的β氧化194

第十五章 免疫化学196

实验48 免疫血清的制备196

实验49 琼脂扩散法测定抗体效价197

实验50 酶联免疫吸附法199

主要参考文献201

附录202

一、生物化学实验室规则202

二、实验室安全及防护知识202

三、常用仪器的使用方法205

四、常用缓冲溶液的配制212

五、常用酸碱指示剂217

六、常用酸碱试剂的浓度及相对密度218

七、标准溶液的配制和标定218

八、25℃时调整硫酸铵溶液铵饱和度计算表219

九、常见元素的相对原子质量220

十、数据处理221

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