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第一章 流式细胞仪的工作原理&吴煦 杨海霞1

第一节 流式细胞仪的发展史1

第二节 流式细胞仪的基本原理3

第三节 流式细胞仪的结构组成3

一、激光及光束成形系统3

二、液流系统4

三、流式细胞仪中的光信号收集系统5

四、电子系统8

五、FCM测量数据的存贮、显示与分析10

第四节 流式细胞仪的检测信号及意义11

一、散射光信号的检测11

二、荧光信号的检测13

第五节 流式细胞仪的主要分析技术指标17

一、荧光灵敏度17

二、仪器分辨率17

三、前向散射光灵敏度18

四、细胞分析速度18

第六节 细胞分选18

一、电荷式细胞分选18

二、捕获管分选19

三、FCM分选指标20

第七节 高端流式细胞仪的简介和展望21

一、FACSCantoⅡ流式细胞仪21

二、LSRⅡ高端生命科学研究型流式细胞仪22

三、FACSAriaⅡ高速流式细胞分选仪23

四、Influx高端流式细胞分选仪24

五、MACSQuantTM流式细胞仪——细胞分析的里程碑25

第二章 流式细胞仪的标本制备、检测及质量控制&王亚哲28

第一节 标本的制备及保存28

一、标本的准备28

二、细胞计数29

三、荧光染色30

四、质量控制33

第二节 荧光素的特性及应用34

一、常用荧光素的主要特点35

二、荧光素的选择和搭配37

第三节 仪器调整及数据获取40

一、仪器的校准和调整40

二、流式细胞仪测定及数据获取44

第四节 数据分析和报告45

一、数据分析45

二、数据解释及报告49

第三章 正常血细胞发育过程的抗原表达规律&刘艳荣52

第一节 正常髓细胞系抗原的表达规律52

一、正常粒系和单核细胞系抗原的表达规律52

二、正常红系细胞的分化规律60

三、正常巨核细胞分化发育的抗原表达规律60

第二节 正常淋巴细胞分化发育的抗原表达规律61

一、正常B细胞抗原的表达规律61

二、正常T细胞抗原的表达规律64

第四章 急性白血病的免疫表型&刘艳荣 袁婷婷67

第一节 急性白血病的诊断与分型67

一、白血病的概念67

二、急性白血病的FAB分型67

三、急性白血病的MIC分型69

四、急性白血病1999版WHO分类70

五、2008版WHO血液／淋巴系统肿瘤分类71

六、2008版与1999版WHO分类中髓系和淋巴系肿瘤分类的比较73

第二节 急性髓细胞白血病的免疫表型分析73

一、AML伴重现性的遗传学异常74

二、AML无其他特异性异常（NOS）86

第三节 急性淋巴细胞白血病的免疫表型分析100

一、B淋巴母细胞白血病／淋巴瘤100

二、B淋母细胞白血病／淋巴瘤伴重现性的遗传学异常104

三、T淋巴母细胞白血病／淋巴瘤108

第四节 急性系列不明型白血病的免疫表型116

一、急性未分化型白血病118

二、混合表型急性白血病伴t（9；22）（q34；q11.2）；BCR-ABL1118

三、混合表型急性白血病伴t（V；11q23）；MLL重排118

四、混合表型急性白血病，B／髓，NOS119

五、混合表型急性白血病，T／髓，NOS120

六、混合表型急性白血病，NOS-罕见类型120

七、其他混合表型急性白血病121

第五章 髓细胞增殖性疾病的免疫表型分析&刘艳荣 徐娟 万岁桂124

第一节 2008版WHO对髓细胞增殖性疾病的分类124

一、骨髓增殖性肿瘤124

二、骨髓增生异常／骨髓增殖性肿瘤（MDS/MPN）124

三、骨髓增生异常综合征（MDS）124

第二节 骨髓增殖性肿瘤125

一、慢性粒细胞白血病，BCR-ABL1阳性125

二、慢性嗜酸性粒细胞白血病，NOS127

三、肥大细胞增多症128

四、骨髓增殖性肿瘤，未分类129

第三节 骨髓增生异常／骨髓增殖性肿瘤129

一、慢性粒单细胞白血病129

二、非典型慢性粒细胞白血病，BCR-ABL1阴性131

三、幼年型粒单细胞白血病131

四、骨髓增生异常／骨髓增殖性肿瘤，未分类131

第四节 骨髓增生异常综合征132

一、概述132

二、MDS的细胞表面标记133

三、MDS异常结果的判断136

四、质量控制139

五、结论139

第六章 流式细胞术在淋巴增殖性肿瘤中的应用&朱焕玲141

第一节 概述141

一、正常外周血及骨髓标本141

二、良性／反应性实体淋巴组织（淋巴结、扁桃体）142

第二节 成熟B细胞肿瘤143

一、概述143

二、FCM在成熟B淋巴细胞肿瘤中的作用145

三、2008版WHO分类B淋巴细胞增殖性肿瘤的免疫分析147

第三节 成熟T/NK细胞肿瘤155

一、概述155

二、常见的T/NK细胞肿瘤160

第四节 病例分析165

一、多发性骨髓瘤165

二、脾边缘带淋巴瘤166

三、毛细胞白血病166

四、套细胞淋巴瘤167

五、弥漫大B细胞淋巴瘤170

六、T大颗粒细胞白血病171

七、NK白血病／淋巴瘤172

八、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤174

九、间变大细胞淋巴瘤176

十、肝脾T细胞淋巴瘤177

第七章 慢性淋巴细胞白血病和多发性骨髓瘤的免疫表型特点&李建勇 王亚哲179

第一节 慢性淋巴细胞白血病179

一、概述179

二、CLL的免疫表型特点180

三、FCM检测CLL的预后指标181

四、单克隆B淋巴细胞增多症182

五、鉴别诊断182

第二节 多发性骨髓瘤188

一、区分正常和异常浆细胞的抗原189

二、骨髓瘤细胞的设门分析190

三、多发性骨髓瘤的抗原表达190

四、免疫表型与预后192

五、免疫分型与靶向治疗192

六、用于多发性骨髓瘤免疫表型分析的抗体组合192

第八章 急性白血病微量残留病的流式细胞术检测&刘艳荣196

第一节 概述196

一、微量残留病检测的理由196

二、微量残留病检测的方法196

三、白血病相关的免疫表型特点197

第二节 急性淋巴细胞白血病残存白血病检测198

一、B系-ALL的残存白血病检测198

二、T系-ALL的残存白血病检测212

三、ALL微量残留病检测的临床意义215

四、ALL微量残留病检测中FCM与PCR方法的比较217

第三节 急性髓细胞白血病微量残留病检测219

一、正常髓系祖细胞的抗原表达特点219

二、AML微量残留病检测的抗体组合和LAIP特点222

三、AML微量残留病检测的临床意义234

四、AML微量残留病检测中FCM与PCR的比较235

第九章 慢性淋巴细胞增殖性疾病的微量残留病检测&王亚哲239

第一节 慢性淋巴细胞白血病239

一、CLL的微量残留病检测239

二、非霍奇金淋巴瘤的微量残留病检测242

第二节 多发性骨髓瘤243

一、多发性骨髓瘤微量残留病的检测方法及比较243

二、FCM检测多发性骨髓瘤微量残留病的意义245

三、FCM检测多发性骨髓瘤微量残留病的问题和共识246

第十章 流式细胞术分析造血干细胞&刘艳荣250

第一节 造血细胞的分化、发育与成熟规律250

一、造血250

二、造血干细胞的分化、发育、成熟252

第二节 造血干／祖细胞的生物学特征252

一、造血干细胞252

二、造血干／祖细胞的实验研究253

三、造血干祖细胞分化的等级性255

第三节 造血干／祖细胞的免疫表型分析256

一、造血干细胞的免疫表型特点256

二、造血祖细胞的免疫表型特点257

第四节 造血干／祖细胞的计数258

一、FCM计数CD34+细胞的标准化方案260

二、ISHAGE法检测CD34+细胞262

三、ProCOUNTTM造血干／祖细胞计数265

第十一章 流式细胞术在造血干细胞移植中的应用&常英军 主鸿鹄 刘艳荣271

第一节 造血干细胞移植后造血、免疫重建监测271

一、HSCT后的造血重建271

二、HSCT后的免疫重建273

三、HSCT后造血和免疫重建的研究前景279

第二节 造血干细胞移植后微量残留病检测280

一、微量残留病检测在造血干细胞移植中应用的必要性280

二、FCM检测微量残留病的方法学280

三、HSCT前微量残留病检测的意义281

四、HSCT后微量残留病检测的意义282

五、HSCT后微量残留病检测的时间点284

六、微量残留病检测对移植后供者淋巴细胞输注的疗效判断285

第十二章 常见红细胞病的流式分析&邵宗鸿 付蓉 李丽娟 刘惠 刑莉民289

第一节 阵发性睡眠性血红蛋白尿289

一、概述289

二、锚连蛋白检测289

三、嗜水气单胞菌溶素变异体检测293

四、结语和展望295

第二节 免疫相关性血细胞减少症296

一、概述296

二、骨髓单个核细胞膜抗体的检测296

三、B淋巴细胞胞内抗体的检测299

四、B淋巴细胞亚群的检测300

五、骨髓B淋巴细胞凋亡相关蛋白水平301

六、DC亚群的检测（DC1/DC2）303

七、Th1细胞和Th2细胞的检测304

八、Th17细胞的检测306

九、Treg细胞激活状态的检测307

十、结语和展望308

第三节 自身免疫性溶血性贫血308

一、概述308

二、FC-DAT实验原理309

三、试剂309

四、方法309

五、FC-DAT结果310

六、临床意义311

七、结语和展望311

第十三章 流式细胞术与血小板分析&刘艳荣 王亚哲 袁婷婷312

第一节 概述312

一、基本概念312

二、血小板的生理功能312

三、流式细胞术在血小板分析中的应用313

第二节 血小板膜表面糖蛋白分析314

一、血小板膜糖蛋白组成314

二、膜糖蛋白检测315

第三节 流式网织血小板计数318

一、检测方法319

二、临床意义320

第四节 血小板自身抗体测定321

一、检测方法321

二、临床意义323

第五节 流式血小板计数323

一、红细胞与血小板比值法324

二、荧光微粒绝对计数法（TruCOUNT法）324

三、临床意义325

第十四章 免疫功能检测&万岁桂327

第一节 淋巴细胞亚群分析327

一、淋巴细胞的发育及其表面标记327

二、淋巴细胞的亚群329

三、淋巴细胞亚群的免疫表型分析方法333

第二节 Th1/Th2细胞338

一、Th细胞的表型和功能特征338

二、Th1/Th2细胞流式细胞仪检测方法339

第三节 调节性T细胞341

一、天然CD4+CD25+Treg342

二、Tr1细胞343

三、Th3细胞343

四、Treg流式细胞术检测方法343

第十五章 免疫分型的抗体组合原则及报告标准化&刘艳荣347

第一节 常用的抗体介绍347

第二节 白血病免疫分型的抗体组合原则和实例351

一、国际指南中抗体使用原则介绍351

二、国际流式细胞专家的共识352

三、笔者使用的主要抗体和组合实例354

第三节 免疫分型报告的标准化358

附录 《血液淋巴系统肿瘤细胞的临床流式分析指南》解读363