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第1篇 瘤胃微生物研究方法2

第1章 瘤胃微生物传统研究方法2

第1节 瘤胃细菌的培养、计数、分类和保藏2

第2节 瘤胃真菌的培养、计数和保藏10

第3节 瘤胃原虫的培养、计数、分类和保藏14

第2章 瘤胃微生物分子生态学研究方法22

第1节 瘤胃微生物样品采集与前处理22

第2节 瘤胃微生物总DNA提取25

第3节 瘤胃微生物的实时定量PCR方法30

第4节 瘤胃微生物多样性的变性梯度凝胶电泳分析40

第5节 瘤胃微生物多样性的RFLP和T - RFLP分析45

第6节 瘤胃微生物16S/18S rDNA文库构建53

第3章 瘤胃微生物元基因组学研究方法62

第1节 瘤胃微生物细菌人工染色体（BAC）文库构建与鉴定63

第2节 瘤胃微生物BAC文库中纤维素酶活性克隆的筛选73

第3节 瘤胃微生物BAC文库中脲酶活性克隆的筛选79

第4节 瘤胃微生物BAC文库中脂肪酶活性克隆的筛选85

第2篇 营养消化吸收研究方法92

第4章 体外模拟瘤胃发酵研究方法92

第1节 体外发酵产气法92

第2节 短期静态体外发酵批次培养法96

第3节 持续动态人工瘤胃法99

第5章 消化道瘘管安装方法104

第1节 术前准备104

第2节 瘤胃瘘管安装手术111

第3节 十二指肠近端T型瘘管安装手术115

第4节 回肠末端T型瘘管安装手术120

第5节 术后动物护理121

第6章 瘤胃营养代谢研究方法124

第1节 瘤胃营养灌注方法124

第2节 瘤胃液pH检测127

第3节 瘤胃甲烷排放量测定129

第4节 饲料养分瘤胃降解率测定133

第5节 瘤胃液氨态氮的检测136

第6节 瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定139

第7节 瘤胃液共轭亚油酸的测定141

第8节 瘤胃液中脂肪酸的测定143

第9节 瘤胃纤维素酶活性测定145

第10节 瘤胃亚油酸异构酶和共轭亚油酸还原酶活性测定149

第11节 瘤胃液蛋白酶活性测定151

第12节 瘤胃细菌脲酶活性的测定154

第13节 瘤胃细菌脂肪酶活性的测定156

第7章 小肠营养物质消化吸收研究方法161

第1节 小肠营养灌注方法161

第2节 小肠食糜流量测定164

第3节 移动尼龙袋法测定饲料小肠养分消化率168

第4节 酶解法评定饲料小肠消化率171

第5节 小肠冻干粉法评定饲料消化率174

第3篇 血液生化指标研究方法180

第8章 血管插管手术方法180

第1节 颈动脉插管和皮管安装手术180

第2节 颈静脉留置针安装手术183

第3节 小肠间膜静脉血管插管安装手术184

第4节 肝脏门静脉血管插管安装手术186

第5节 瘤胃壁静脉血管插管安装手术188

第6节 子宫卵巢静脉血管插管安装手术190

第9章 血液生化指标分析方法192

第1节 血样的采集193

第2节 血样的制备195

第3节 血液抗凝剂的制备197

第4节 无蛋白质血液的制备198

第5节 用自动生化分析仪测定血液生化指标199

第6节 血清蛋白质的电泳法测定201

第7节 血糖的光谱法测定205

第8节 血酯的光谱法测定207

第9节 血液中共轭亚油酸（CLA）的测定209

第4篇 组织和细胞生物学研究方法214

第10章 活体组织取样方法214

第1节 肝脏活体微创取样方法214

第2节 乳腺活体取样方法217

第3节 瘤胃液口腔采样方法220

第11章 奶牛乳腺上皮细胞体外培养方法225

第1节 奶牛乳腺上皮细胞体外培养研究概述225

第2节 原代乳腺上皮细胞分离培养方法226

第3节 乳腺上皮细胞的传代、冻存和复苏232

第4节 乳腺上皮细胞生长的生物学鉴定235

第5节 乳腺上皮细胞染色体核型分析242

第6节 乳腺上皮细胞标志性蛋白的免疫组化检测244

第7节 乳腺上皮细胞特异性分泌蛋白的检测246

第5篇 分子生物学研究方法254

第12章 营养代谢蛋白质组学研究方法254

第1节 蛋白质组学研究方法概述254

第2节 奶牛血浆和乳蛋白质组学研究方法258

第13章 奶牛乳腺基因组学研究方法269

第1节 基因组学研究方法概述269

第2节PAGE法克隆奶牛乳腺上皮细胞中的miRNA277

第3节 基因芯片检测奶牛乳腺上皮细胞基因表达谱283

第6篇 牛奶品质研究方法300

第14章 生乳理化指标评价方法300

第1节 新鲜度300

第2节 酸度301

第3节 杂质度303

第4节 相对密度305

第5节 冰点307

第6节 感官指标309

第15章 生乳营养成分评价方法311

第1节 蛋白质311

第2节 脂肪314

第3节 乳糖318

第4节 全脂乳固体及非脂乳固体323

第5节 氨基酸325

第6节 维生素333

第7节 微量元素340

第8节 乳成分的快速测定方法347

第16章 液态奶热加工质量评价方法351

第1节 液态奶热加工质量评价方法概述351

第2节 巴氏杀菌乳热加工质量评价354

第3节 超高温灭菌乳加工质量评价365

第4节 液态奶中复原乳的鉴定375

第17章 牛奶中活性成分检测方法384

第1节 牛奶中活性成分检测方法概述384

第2节 牛奶中CLA等脂肪酸的测定方法389

第3节 免疫单扩散法检测牛初乳IgG含量392

第4节SDS-PAGE法测定牛奶中乳铁蛋白含量396

第5节 间接ELISA方法测定牛奶中特异性抗体效价401

第6节 夹心ELISA方法测定乳中免疫球蛋白含量405

第7篇 牛奶安全指标评价方法414

第18章 生乳中污染物评价方法414

第1节铅414

第2节汞416

第3节 无机砷419

第4节铬421

第19章 生乳中真菌毒素和微生物评价方法424

第1节 黄曲霉毒素M1424

第2节 菌落总数428

第3节 致病菌430

第20章 生乳中农药残留和兽药残留评价方法432

第1节 六六六、滴滴涕和林丹432

第2节 有机磷435

第3节 微生物法436

第4节 青霉素类437

第5节 四环素类440

第6节 磺胺类443

第21章 生乳中违禁添加物评价方法446

第1节 三聚氰胺446

第2节 硫氰酸根449

第3节 工业用火碱451

第4节 革皮水解物453

第5节β-内酰胺酶456

第6节 玉米赤霉醇460

第22章 生乳中体细胞评价方法465

第1节 测定牛奶中体细胞数的显微镜法465

第2节 测定牛奶中体细胞数的荧光光电计数法467

第3节 测定牛奶中体细胞数的电子粒子计数法468

第8篇 饲料中纤维素和动物源性成分检测及饲用微生物研究方法472

第23章 饲料中纤维素成分检测方法472

第1节 粗纤维的测定473

第2节 中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和木质素的测定475

第3节 酸性洗涤不溶氮和中性洗涤不溶氮的测定478

第24章 饲料中动物源性成分PCR检测方法482

第1节 饲料中动物源性成分检测方法研究概述482

第2节 饲料样品的采集和制备488

第3节 饲料中牛、羊、猪、鸡和鱼源性成分的PCR检测方法491

第4节 饲料中乳粉与肉骨粉的PCR区分498

第25章 饲用微生物研究方法504

第1节 饲用乳酸菌的筛选鉴定504

第2节 饲用酵母菌的筛选鉴定512

第3节 饲用芽孢杆菌的筛选鉴定522

第4节 饲用微生物的评价方法529

第9篇 试验设计与数据处理542

第26章 常用试验设计与数据分析542

第1节 试验方案设计542

第2节 重复观测试验数据的统计分析551

缩略词表557