图书介绍

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基础分子生物学实验指导
  • 卢亚萍主编;沈文飚副主编 著
  • 出版社: 北京:高等教育出版社
  • ISBN:7040418590
  • 出版时间:2015
  • 标注页数:143页
  • 文件大小:24MB
  • 文件页数:151页
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图书目录

第一章 基因组DNA操作技术1

第一节 基因组DNA的提取2

实验一 SDS法提取小麦叶片DNA3

实验二 动物组织基因组DNA的提取5

实验三 细菌基因组DNA的提取6

第二节 DNA质量的检测8

实验四 核酸的酶切及电泳9

第三节 Southern杂交技术12

实验五 小麦基因组DNA的Southern杂交13

第二章 质粒操作技术17

第一节 外源基因插入质粒及转化大肠杆菌18

实验一 外源基因与质粒载体的连接21

实验二 热击法转化质粒22

第二节 质粒的提取及检测24

实验三 碱裂解法提取大肠杆菌质粒25

实验四 质粒的酶切鉴定26

第三章 RNA操作技术29

第一节 总RNA的提取及分析30

实验一 用TRIZOL试剂提取小麦叶片总RNA31

实验二 从冰冻血液中提取总RNA33

实验三 总RNA的变性凝胶电泳33

第二节 Northern杂交技术36

实验四 小麦衰老相关蛋白基因的Northern杂交37

第三节 cDNA文库构建及筛选40

实验五 小麦cDNA文库的构建41

第四章 PCR技术与应用47

第一节 普通PCR48

实验一 PCR检测重组质粒中的插入片段52

实验二 随机引物扩增多态DNA(RAPD)53

附 用16S rDNA方法鉴定细菌种属55

第二节 反转录PCR58

实验三 反转录PCR扩增小麦β-actin基因59

第三节 定时荧光定量PCR61

实验四 定时荧光定量PCR测定小麦中Cu/Zn-SOD基因含量63

第五章 电子克隆65

实验一 基于生物信息学克隆水稻过氧化氢酶基因75

第六章 蛋白质分离与检测技术79

第一节 SDS-PAGE电泳分离蛋白质80

实验一 SDS-PAGE电泳检测蛋白质相对分子质量82

附 1,5-二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶的层析分离与电泳鉴定83

第二节 Western杂交技术87

实验二 小麦RuBisCO蛋白的Western杂交88

第三节 等电聚焦电泳91

实验三 小麦过氧化物酶同工酶的等电聚焦分析92

第四节 蛋白质双向电泳95

实验四 蛋白质双向电泳检测小麦叶片蛋白97

第七章 外源基因的表达101

第一节 外源基因在大肠杆菌中的表达102

实验一 绿色荧光蛋白基因表达载体的构建104

实验二 绿色荧光蛋白在大肠杆菌中的诱导表达107

第二节 外源基因在枯草杆菌中的表达109

实验三 枯草杆菌电击转化(高渗透法)112

实验四 重组载体pHT43-lip在枯草杆菌中的分泌表达114

第三节 外源基因在酵母中的分泌表达116

实验五 绿色荧光蛋白重组表达载体pPIC9K-GFP的构建121

实验六 绿色荧光蛋白在毕赤酵母中的诱导表达123

主要参考文献126

附录127

附录一 常用试剂及缓冲液127

附录二 氨基酸及遗传密码132

附录三 常用的相对分子质量标记133

附录四 分子生物学有关网络资源135

附录五 分子实验常用仪器设备136

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