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1绪论1

1.1植物组织培养的一般概念1

1.2植物组织培养的发展简史4

1.2.1探索阶段（本世纪初至30年代中）4

1.2.2奠基阶段（30年代中至50年代末）5

1.2.3迅速发展阶段（60年代至现在）8

1.3组织培养与农业的关系10

2实验室的基本设备和一般技术12

2.1 引言12

2.2设备12

2.2.1培养基室12

2.2.2培养容器13

2.2.3培养室14

2.3技术16

2.3.1玻璃器皿和塑料器皿的清洗16

2.3.2灭菌16

附录2.Ⅰ 植物组织无菌培养的一般步骤22

附录2.Ⅱ 组织培养工作所需的各种用具23

3培养基26

3.1 引言26

3.2培养基成分27

3.2.1无机营养成分27

3.2.2有机营养成分33

3.2.3生长激素34

3.2.4琼脂35

3.2.5 pH37

3.3培养基的选择37

3.4培养基的制备40

附录3.Ⅰ 植物组织培养基常用化合物分子量43

附录3.Ⅱ原子量46

4细胞培养48

4.1 引言48

4.2单细胞的分离48

4.2.1由完整的植物器官分离单细胞48

4.2.2由培养组织中分离单细胞50

4.3悬浮培养51

4.3.1一般技术51

4.3.2细胞悬浮培养的培养基55

4.3.3培养基的振荡55

4.3.4悬浮培养细胞的同步化57

4.3.5悬浮培养中细胞生长的计量58

4.3.6培养细胞活力的测定59

4.4单细胞培养60

4.4.1单细胞培养方法61

4.4.2影响单细胞培养的因子66

4.5细胞培养的应用70

4.5.1突变体选择70

4.5.2工业应用73

4.5.3诱导多倍性75

附录4.Ⅰ 由篱天剑叶片分离叶肉细胞的机械方法75

附录4.Ⅱ 酶解法分离烟草叶肉细胞的程序76

5 细胞的全能性与器官发生77

5.1 引言77

5.2细胞分化78

5.2.1影响维管组织分化过程的因子79

5.2.2细胞分裂对木质部分化的必要性82

5.3器官分化84

5.3.1影响茎芽分化的因素85

5.3.2茎芽分化的解剖学和细胞学90

5.3.3表皮细胞的全能性92

5.3.4冠瘿瘤细胞的全能性95

6体细胞胚胎发生97

6.1 引言97

6.2体细胞胚胎发生的例证98

6.3影响体细胞胚胎发生的因子101

6.3.1生长调节物质101

6.3.2氮源104

6.3.3其他因子105

6.4体细胞胚胎发生的解剖学和细胞学105

6.5体细胞胚的成熟过程107

6.6体细胞胚与合子胚的比较108

6.7由单细胞到植株109

6.8长期培养物形态发生潜力的丧失109

6.8.1遗传说110

6.8.2生理说110

6.8.3竞争说111

6.9细胞全能性的实际应用111

6.9.1细胞全能性的应用111

6.9.2人工种子112

6.10结束语114

附录6.Ⅰ 诱导体细胞胚胎发生的实验程序115

7单倍体的产生118

7.1 引言118

7.2花药培养技术119

7.3影响雄核发育的因子120

7.3.1营养需要120

7.3.2药壁因子125

7.3.3花粉发育时期126

7.3.4温度和光照126

7.3.5供体植株的生理状态128

7.4雄核发育单倍体的个体发生过程129

7.4.1花粉单倍体的诱导130

7.4.2雄核发育早期过程的4种途径131

7.4.3雄核发育晚期过程的差异133

7.5禾谷类植物花药培养中白化苗的形成135

7.6离体小孢子和花粉培养135

7.7通过远缘杂交产生单倍体139

7.8单倍体植株的二倍化140

7.9在高等植物中单倍性的意义142

7.9.1概述142

7.9.2单倍体在作物改良中应用的实例143

7.10结束语144

附录7.Ⅰ 烟草花药培养实验程序146

8三倍体的产生148

8.1 引言148

8.2愈伤组织的形成149

8.2.1外植体149

8.2.2培养基150

8.2.3物理因子152

8.3愈伤组织的组织学和细胞学153

8.4器官发生154

8.4.1影响茎芽分化的因素155

8.4.2茎芽的个体发生过程160

8.5胚乳培养的应用161

8.6结束语162

9细胞遗传学研究163

9.1引言163

9.2培养细胞的一般特征165

9.3核变异的起源166

9.3.1初生愈伤组织166

9.3.2建成愈伤组织167

9.4影响离体培养细胞核型变异的因子171

9.4.1培养基171

9.4.2组织原有的倍数性173

9.5核型变化和形态发生173

9.6花粉植株中的倍数性变异175

9.7嵌合性178

9.8植株再生的遗传控制179

9.9组织培养诱发变异的实际应用180

9.9.1在再生植株中对变异体的选择181

9.9.2在细胞水平上对变异体的选择185

9.10离体入选的变异性状在再生植株中的表达和遗传188

9.10.1变异体和突变体189

9.10.2后生遗传和遗传189

9.11结束语190

10离体授粉192

10.1 引言192

10.2术语释义194

10.3离体授粉的方法194

10.4胚珠和子房培养196

10.4.1胚珠培养196

10.4.2子房培养200

10.5离体授粉中影响结实的因子201

10.5.1外植体201

10.5.2培养基202

10.5.3培养条件205

10.5.4基因型206

10.6离体授粉的应用206

10.7结束语207

11合子胚培养209

11.1引言209

11.2合子胚培养方法210

11.2.1植物材料212

11.2.2消毒方法213

11.2.3胚的剥离213

11.2.4胚乳看护培养217

11.3对培养基和培养条件的要求219

11.3.1无机盐222

11.3.2碳水化合物和培养基的渗透压224

11.3.3氨基酸和维生素225

11.3.4天然的植物浸提物226

11.3.5生长调节物质228

11.3.6培养基的pH228

11.3.7培养条件229

11.4胚柄在胚培养中的作用229

11.5早熟萌发231

11.6胚分化不全的种子在培养中的形态发生234

11.7显微手术实验236

11.8寄生性被子植物胚和种子的培养240

11.9胚愈伤组织的形态发生潜力241

11.10实际应用242

11.10.1获得稀有杂种242

11.10.2单倍体的产生245

11.10.3缩短育种周期246

11.10.4种子生活力的快速测定246

11.10.5稀有植物的繁殖246

11.11结束语247

12原生质体的分离和培养248

12.1 引言248

12.2原生质体的分离249

12.2.1影响原生质体产量和活力的因子250

12.2.2原生质体的净化256

12.2.3原生质体活力的测定257

12.3原生质体培养257

12.3.1细胞壁的形成259

12.3.2细胞分裂和愈伤组织的形成260

12.3.3禾谷类植物原生质体培养267

12.3.4植株再生270

附录12.Ⅰ 用一步法制备烟草叶肉原生质体271

附录12.Ⅱ 细胞筛孔径（μm）与目换算表272

附录12.Ⅲ 离心机转数与离心力的列线图273

附录12.Ⅳ用血球计数板计数原生质体的方法274

13体细胞杂交276

13.1引言276

13.2原生质体融合277

13.2.1自发融合277

13.2.2诱发融合277

13.2.3化学诱导融合的机制281

13.2.4融合产物的细胞学283

13.3杂种细胞的选择系统285

13.4体细胞杂种植株的核型291

13.5细胞质杂种292

13.6体细胞杂种和胞质杂种的鉴定方法295

13.7 通过原生质体摄入细胞器、微生物和DNA进行细胞的遗传饰变295

13.7.1叶绿体移植296

13.7.2核移植298

13.7.3微生物移植298

13.7.4外源DNA的摄入299

13.7.5离体原生质体的其他用途301

13.8结束语301

附录13.Ⅰ 高pH－高浓度Ca2+诱导原生质体融合的实验程序302

附录13.Ⅱ PEG诱导原生质体融合的实验程序303

14植物脱毒技术305

14.1 引言305

14.2术语释义306

14.3通过热处理消除病毒307

14.4通过茎尖培养消除病毒309

14.4.1外植体名称309

14.4.2方法309

14.4.3在茎尖培养中影响脱毒效果的因素311

14.5通过愈伤组织培养消除病毒320

14.6脱毒效果的检验321

14.7无毒原种的保存322

14.8脱毒植株的应用323

14.9病毒以外病原菌的离体消除方法323

14.10通过茎尖培养消除病毒的注意事项324

14.11结束语325

附录14.Ⅰ 马铃薯脱毒程序326

15离体无性繁殖方法328

15.1 引言328

15.2兰花的繁殖329

15.3微繁的一般方法332

15.3.1培养物的建立332

15.3.2茎芽增殖的3种途径335

15.3.3离体形成的枝条的生根341

15.3.4移栽342

15.4影响微繁效果的若干因素343

15.4.1培养基343

15.4.2光照和温度347

15.5木本植物的微繁347

15.5.1外植体348

15.5.2培养基的褐变349

15.5.3间苯三酚（PG）的作用350

15.6微繁的应用350

15.7微繁方法的局限性351

15.8结束语352

附录15.Ⅰ 卡特兰微繁培养基成分354

附录15.Ⅱ 兰花微繁培养基成分356

附录15.Ⅲ 应用M S基本培养基进行微繁的一些栽培植物358

附录15.Ⅳ 杜鹃花微繁培养基成分364

附录15.Ⅴ草莓微繁培养基成分365

16种质贮存366

16.1 引言366

16.2冷冻保存367

16.2.1植物材料的性质369

16.2.2冷冻前的处理369

16.2.3冷冻防护剂369

16.2.4冷冻370

16.2.5贮存373

16.2.6解冻374

16.2.7重新培养374

16.2.8细胞和器官冷冻保存后的存活率375

16.3低温贮存376

16.4结束语377

附录16.Ⅰ 冷冻保存玉米悬浮培养细胞的程序377